利 用 常 壓 室 溫 等 離 子 體(atmos- phericroomtemperatureplasma,ARTP)誘變靈芝出發(fā)菌株 G0157的原生質(zhì)體,獲得了103株誘變 菌株?;谏鲜稣T變菌株液體發(fā)酵菌絲體水提物的抗氧化能力,從中篩選抗氧化能力強(qiáng)的 優(yōu)良菌株,并測(cè)定這些優(yōu)良菌株菌絲體水提物中多糖、多酚含量,研究其與抗氧化能力間的相關(guān)性。HWS-24電熱恒溫水浴鍋(上海一恒科學(xué)儀器有限公司);MS105DU 分析天平(蘇州Science儀器 有限公司);Biotek-SynergyHT酶標(biāo)儀(美國(guó) Bio-Tek公司);ZWY-2102雙層恒溫培養(yǎng)振蕩器(上海智 城分析儀器制造有限公司);5810R 冷凍離心機(jī)(德國(guó) Eppendorf公司)。
鐵離子還原能力測(cè)定(FRAP法):根據(jù) BENZIE 等的方法稍作改動(dòng)。以 FeSO4·7H2O 為參照 物,考察各菌株菌絲體水提物的鐵離子還原能力。?。埃担恚虡悠啡芤褐糜诰呷嚬苤校尤耄矗担恚? FRAP反應(yīng)液,混勻,避光反應(yīng)10min,在593nm 處測(cè)定反應(yīng)液的吸光度值。以0、100、200、300、400、 500、600μmol·L-1FeSO4·7H2O 溶液為標(biāo)準(zhǔn)溶液繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品的鐵離子還 原能力,即 FRAP值。 各誘變菌株的 DPPH 自由基清除能力測(cè)定結(jié)果。在1mg·mL-1時(shí),出發(fā)菌株菌絲體 水提物的 DPPH 自由基清除率僅為3.54%,陽(yáng)性對(duì)照 VC清除率達(dá)到87.06%,ARTP誘變菌株菌絲體 水提物的 DPPH 自由基清除率均小于45%,多數(shù)誘變菌株的 DPPH 自由基清除率與出發(fā)菌株無(wú)顯著 差異,僅部分誘變菌株的清除率顯著高于出發(fā)菌株 G0157,A14、A19、A22、A23、A28、A40、A52、A78、 A81、A85、A86、A88、A98、A103等 14個(gè)誘變菌株的清除率達(dá)到10%以上,其中 A14和 A19等2個(gè)誘 變菌株達(dá)到44.61%和43.79%。因此,選擇這14個(gè)菌株為初篩獲得的優(yōu)良誘變菌株。